鱟試驗法——用熒光測定檢測細菌內毒素含量的方法

將熒光母素（fluorescamine)加入鱟試劑中，可使參與凝膠反應的蛋白分子被熒光素標記上。在形成凝膠的過程中，由于蛋白分子產生聚合結構變化，結合于蛋白的熒光素因部分蛋白隨水分子運動而同時發生旋轉，導致熒光偏光度發生變化。令熒光偏光度為P，垂直熒光強度為I₁，水平熒光強度為I₂，則可見Р值由于凝膠化而增加，其值可按下式求得如下圖:

Р值與標本中內毒素的含量呈線性關系。

實驗時所用的熒光母素濃度常為0.02%。因為熒光母素濃度在0.05%以上時，聚合反應有明顯的抑制，0.025%有輕微的抑制作用。

鱟試劑凝膠化，可以使P值增大，其反應潛伏期的長短與P值增大的程度取決于內毒素的濃度。當內毒素在10^-2μg/ml時，5分鐘內P值開始增大，而10^-3μg /ml時，則在30分鐘仍看不出P值的增大，當內毒素<10^-3μg /ml時，濃度越小潛伏期越長。從而形成了P值上升的圖像，據此可求出回歸直線方程。

設傾斜度為b，潛伏期為t ，計算b/t值。如按不同濃度的標準內毒素計算結果繪成曲線，可見內毒素在10^-8～10^-3μg /ml范圍內呈上升型直線，其相關系數為0.9804，方程式為:

Y = 0.0207 + 0.0797x

(R = 0.9804)

根據標準曲線，即可求出被檢標本中內毒素的含量。

本試驗的操作均在0℃進行，測定時則在25℃進行。應觀察60分鐘內反應的全過程，每隔5分鐘測定一次。