脂多糖中O抗原特異性多糖的連接反應和表面表達

O抗原多糖鏈在細胞膜的周質間隙面與脂質A核心區域連接，形成完整的脂多糖分子。脂多糖分子從周質間隙轉移到外膜，但呈遞在細胞外膜的機制目前還并不清楚，推測可能是通過內、外膜黏附位點處的“Bayer橋"而實現。

Waal（即Rfal）是目前已知惟一與連接反應有關的酶。Waal能夠有效地將大相對分子質量多聚體或小相對分子質量寡聚體連接到脂質A核心區域上。連接反應的基本特點是具有保守性，不依賴于O抗原合成途徑。不同的細菌通過不同途徑合成的O抗原均能有效地連接和表達在細胞表面上，這也是大腸桿菌K-12基因工程菌株研究和表達異源O抗原的基礎。

大腸桿菌K-12和鼠傷寒沙門菌Waal酶的一級結構并無明顯相似性，雖均含有多個跨膜域，其疏水側（hydropathy profiles ）結構明顯相似，但二者功能不能互補。每種Waal 酶的有效活性可能需Waak（即Rfak）的協調作用，說明每種Waal 的活性發揮可能需要相對應的Waak酶進行特異性的核心結構修飾或（和）Waal 與Waak 蛋白質之間的特異性作用。在細胞表面，O抗原可只以與脂質A核心結合的方式存在（如鼠傷寒沙門菌），也可以與脂質A核心結合以及不結合的方式存在。后者的代表是霍亂弧菌O139的O抗原，與核心連接的只有一個短的（單一的重復單位）寡糖，大相對分子質量的莢膜多糖（不與核心連接）含有相同的重復單位結構。