細菌內毒素中臨床樣品測定值的影響因素

1、對細菌內毒素活性影響

我們知道，樣品中鐵、鋁等離子能夠引起細菌內毒素活性的降低，當我們在內毒素溶液中只需加入0. 04mM的鐵，0. 02mM的鋁，就可引起內毒素活性下降30%左右，另外其他金屬離子如Mg2+、Ga2+等也有這種影響。雖然這種情況對于臨床樣品測定影響不大，但是我們在使用內毒素標準品稀釋過程及測定時要引起注意。

2、測定方法的影響

前面我們已經介紹，在眾多鱟試驗法中，作為臨床體外診斷試劑許可的常用內毒素測定法，主要是微量定量的比濁時間分析法和合成基質法兩種。

1.比濁時間分析法

系根據LAL/TAL試劑與內毒素反應所形成的濁度變化作為指標的一種手段，因此它很容易受到樣品中的濁度影響。但是我們知道，測定中沒有絕對的濁度值，由于是以變化率作為指標，因此在有濁度的樣品中進行測定時，反應過程中不受沒有非特異性濁度變化的情況是不可能的，另外，使用表面活性劑的稀釋加熱法，可使測定過程中的非特異濁度變化減輕。今后，人們期待著開發能夠避免非特異濁度變化影響的前處理方法和測定方法。

2.合成基質法

是以LAL/TAL試劑凝固酶肽合成基質水解作為指標和分析方法，分為終點比色法和動態比色法。在終點比色法中，由于測定分離PNA的對銷基苯胺的黃色(405nm)或偶氮化后的紅色(545nm)，因此要注意膽紅素等黃色物質共存的影響以及各種磺胺類制備對紅色的假陽性影響。

3.血漿成分的影響

血漿中的抗凝血酶Ⅲ，a2纖維蛋白溶酶抑制劑等對LAL試劑中的凝固酶存在干擾作用，為了去除這些影響，人們開發出了各種前處理方法。另外血中還存在著對測定產生影響的各種各樣內毒素結合物質，如：甘油三酯核糖蛋白，高密度核糖蛋白(HDL)及低密度核糖蛋白(LDL)LBP、BPI等，這些物質也會干擾鱟試驗測定。這些物質的影響可以考慮為對內毒素活性干擾作用。這些物質在反應液中存在時，就有可能抑制內毒素的活性，但是在使用酸處理或加熱處理測定血中的內毒素時，這些蛋白性的內毒素結合物質變性的可能性很強。因此，我們在測定時要引起注意。

4.我國發展現狀

到目前為止，國外對于血中的微量細菌內毒素測定一般均采用定量的動態比濁法和比色法，用于臨床的診斷及研究也十分普遍，而且均具有專門的試劑盒。國內由于在定量方法上的研究起步較晚，加之定量比色試劑也剛剛開發出來，因此在臨床上的研究還剛剛開始。雖然有一些單位一直進行這方面的檢驗工作，但幾乎都是使用半定量凝膠法，加之血液前處理方法的使用也各不相同，因此各個單位之間數據參差不齊，無法比較。故建立標準化前處理方法以及測定方法才能準確檢測血中內毒素，為臨床的早期診斷提供理論依據。

相信在不遠的將來，內毒素的含量測定將在臨床檢驗領域得到快速發展和應用。